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                            宏基因組測序分析

                            宏基因組測序分析 




                            宏基因組測序研究

                            宏基因組學(Metagenomics)研究通過全基因組鳥槍法(Whole Genome Shotgun,WGS)測序策略,將提取獲得的微生物組總DNA隨機打斷為短片段,并構建合適長度的插入片段文庫,對這些文庫進行雙端(Paired-end,PE)高通量測序,從而能全面精細地展示整個菌群的功能代謝譜和物種精細組成譜,進而在組成和功能水平分別挖掘關鍵生物標記物,從原理上闡明微生物群落在生態系統中發揮作用的根本機制。

                            產品特點

                            1. 直接對菌群樣本中的基因片段進行測序,真實再現菌群復雜而精密的生態功能;

                            2. 使用Illumina HiSeq系列超高通量測序平臺,周期更短,每個樣本都能一次性獲得至少10 Gb的測序數據量,真正實現對物種和功能的精確定量;

                            3. 多種功能注釋數據庫可選,根據研究需求選擇KEGG/EggNOG/CAZy/NR/Swiss-Prot/GO/VFDB/CARD等數據庫,最優化宏基因組功能代謝譜注釋;

                            4. 通過微生物基因信息精確識別物種來源,獲取種以及種以下水平的“高分辨率”物種精細組成譜;

                            5. 通過多種多變量統計分析和機器學習方法,系統、深入地挖掘宏基因組大數據中差異相關的關鍵物種和關鍵功能,精確識別關鍵生物標記物。

                            實驗流程

                            微生物組總DNA提取→DNA片段化→連接接頭序列→純化、富集DNA片段→測序文庫定量→上機進行高通量測序

                            分析流程

                            典型分析結果展示

                            KEGG代謝通路差異分析圖

                            LEfSe組間差異的KEGG功能分類等級樹圖

                            EggNOG功能類群組間差異分析圖

                            種水平精細分類組成的Krona交互展示圖

                            CAP主坐標典型相關分析圖

                            功能——物種一致性Procrustes分析圖

                            值得一試的深度分析內容

                            分析項目

                            分析要求

                            分泌蛋白預測分析

                             

                            III型分泌系統效應蛋白預測分析

                             

                            HUMAnN2宏基因組分析流程

                             

                            MOCAT2宏基因組分析流程

                             

                            基于Canopy算法的宏基因組優勢菌株組裝

                            樣本≥ 20


                            研究內容

                            1. 原始數據處理
                            2. 序列拼接
                            3. 基因預測
                            4. 基因功能注釋(NR,Interpro)
                            5. 基于基因的物種分類統計
                            6. 基于16S rDNA的物種分類統計
                            7. COG功能分類和KEGG代謝途徑分析
                            8. 優勢物種的基因組獨立分析

                            Illumina平臺

                            送樣要求 1

                            1. 樣品類型: DNA
                            2. 樣品需求量(單次):≥5μg
                            3. 樣品濃度:≥20ng/μL
                            4. 樣品純度:OD260/280=1.8-2.0并確保DNA無降解
                            5. 樣品保存期間切忌反復凍融,送樣時請使用冰袋或干冰運輸。

                            Roche 454平臺

                            送樣要求 2

                            1. 樣品類型:DNA
                            2. 樣品需求量(單次):≥2μg
                            3. 樣品濃度:≥20ng/μL
                            4. 樣品純度:OD260/280=1.8-2.0并確保DNA無降解
                            5. 樣品保存期間切忌反復凍融,送樣時請使用冰袋或干冰運輸。

                            公司電話:010-65945597/65919547    傳 真:010-65919547   E-mail:[email protected]
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